Στη χημεία, η αραίωση είναι η διαδικασία μείωσης της συγκέντρωσης μιας ουσίας σε ένα διάλυμα. Η αραίωση με αλυσίδα είναι η επαναλαμβανόμενη αραίωση ενός διαλύματος για την ταχεία αύξηση του συντελεστή αραίωσης. Αυτή η διαδικασία εκτελείται συνήθως σε πειράματα που απαιτούν πολύ αραιά διαλύματα με υψηλή ακρίβεια. Για παράδειγμα πειράματα που περιλαμβάνουν καμπύλες συγκέντρωσης σε λογαριθμική κλίμακα ή πειράματα για τον προσδιορισμό της πυκνότητας των βακτηρίων. Οι αραιώσεις αλυσίδας χρησιμοποιούνται ευρέως σε επιστημονικά πειράματα όπως η βιοχημεία, η μικροβιολογία, η φαρμακολογία και η φυσική.
Βήμα
Μέθοδος 1 από 2: Εκτέλεση βασικής αραίωσης
Βήμα 1. Προσδιορίστε το κατάλληλο διαλυτικό διάλυμα
Είναι πολύ σημαντικό να προσδιοριστεί το υγρό που θα χρησιμοποιηθεί για αραίωση. Πολλά διαλύματα είναι διαλυτά σε απεσταγμένο νερό, αλλά αυτό δεν συμβαίνει πάντα. Εάν αραιώνετε βακτήρια ή άλλα κύτταρα, κάντε το σε μέσο καλλιέργειας. Το υγρό που θα επιλέξετε θα χρησιμοποιηθεί για όλες τις αραιώσεις αλυσίδας.
Εάν έχετε αμφιβολίες για το ποιο διαλύτη να χρησιμοποιήσετε, αναζητήστε βοήθεια ή αναζητήστε στο διαδίκτυο. Αναζητήστε παραδείγματα από άλλους που έχουν κάνει παρόμοιες αραιώσεις αλυσίδας
Βήμα 2. Προετοιμάστε έναν αριθμό δοκιμαστικών σωλήνων που περιέχουν 9 mL αραιωτικού
Οι δοκιμαστικοί σωλήνες χρησιμοποιούνται για κενές αραιώσεις. Αρχικά, βάλτε το μη αραιωμένο δείγμα στον πρώτο σωλήνα και, στη συνέχεια, κάντε τις αραιώσεις διαδοχικά στους επόμενους σωλήνες.
- Επισημάνετε όλους τους σωλήνες που χρησιμοποιήθηκαν πριν ξεκινήσετε την αραίωση, ώστε να μην μπερδευτείτε μόλις τελειώσει το πείραμα.
- Κάθε σωλήνας θα γεμίσει με 10 αραιώσεις, ξεκινώντας από το σωλήνα του οποίου η ουσία δεν έχει αραιωθεί. Η αραίωση στον πρώτο σωλήνα είναι 1:10, ακολουθούμενη από 1: 100 στον δεύτερο σωλήνα, 1: 1000 για τον τρίτο και ούτω καθεξής. Προσδιορίστε την ποσότητα αραίωσης που πρέπει να πραγματοποιηθεί εκ των προτέρων, έτσι ώστε να μην σπαταλήσετε το διάλυμα αραιωτικού.
Βήμα 3. Προετοιμάστε έναν δοκιμαστικό σωλήνα που περιέχει τουλάχιστον 2 mL αδιάλυτου διαλύματος
Η ελάχιστη ποσότητα διαλύματος που πρέπει να αραιωθεί για να πραγματοποιηθεί αυτή η αραίωση αλυσίδας είναι 1 mL. Εάν χρησιμοποιείτε μόνο 1 mL, δεν θα απομείνει αδιάλυτο διάλυμα. Ετικέτα BLM για αδιάλυτα διαλύματα.
Αναμείξτε καλά το διάλυμα πριν ξεκινήσετε οποιαδήποτε αραίωση
Βήμα 4. Εκτελέστε την πρώτη αραίωση
Πάρτε 1 mL του αδιάλυτου διαλύματος από τον δοκιμαστικό σωλήνα BLM με μια πιπέτα και τοποθετήστε το σε ένα δοκιμαστικό σωλήνα με την ένδειξη 1:10 που περιέχει 9 mL αραιωτικού και κατόπιν αναμείξτε καλά. Υπάρχει τώρα 1 mL του αδιάλυτου διαλύματος σε 9 mL του διαλύτη. Έτσι, το διάλυμα έχει αραιωθεί με συντελεστή αραίωσης 10.
Βήμα 5. Εκτελέστε τη δεύτερη αραίωση
Για τη δεύτερη αραίωση, πάρτε 1 mL του διαλύματος από το σωλήνα 1:10, στη συνέχεια τοποθετήστε το στον σωλήνα 1: 100 που περιέχει επίσης 9 mL του διαλύτη. Βεβαιωθείτε ότι το διάλυμα στον σωλήνα 1:10 έχει αναμιχθεί εντελώς πριν το προσθέσετε στον επόμενο σωλήνα. Και πάλι, βεβαιωθείτε ότι η αραίωση στον σωλήνα 1: 100 έχει αναμιχθεί πλήρως. Το διάλυμα από το σωλήνα 1:10 αραιώθηκε 10 φορές στον σωλήνα 1: 100.
Βήμα 6. Συνεχίστε αυτή τη διαδικασία για να εκτελέσετε αραιώσεις μεγαλύτερης αλυσίδας
Αυτή η διαδικασία μπορεί να επαναληφθεί όσες φορές είναι απαραίτητο για να επιτευχθεί η επιθυμητή συγκέντρωση διαλύματος. Σε πειράματα που χρησιμοποιούν καμπύλες συγκέντρωσης, μπορείτε να εκτελέσετε αραιώσεις αλυσίδας για να παραγάγετε έναν αριθμό διαλυμάτων με αραιώσεις 1, 1:10, 1: 100, 1: 1.000.
Μέθοδος 2 από 2: Υπολογισμός του Συντελεστή Αραίωσης και Τελικής Συγκέντρωσης
Βήμα 1. Υπολογίστε την αναλογία της τελευταίας αραίωσης στην αραίωση της αλυσίδας
Ο συνολικός λόγος αραίωσης μπορεί να προσδιοριστεί πολλαπλασιάζοντας τον συντελεστή αραίωσης από κάθε βήμα στο τελικό στάδιο. Η μαθηματική απεικόνιση είναι με τον τύπο Dτ = Δ1 XD2 XD3 x… x D , Δτ είναι ο συντελεστής ολικής αραίωσης και D είναι η αναλογία αραίωσης.
- Για παράδειγμα, ας υποθέσουμε ότι κάνετε αραίωση 1:10 4 φορές. Συνδέστε τον παράγοντα αραίωσης στον τύπο: Dτ = 10 x 10 x 10 x 10 = 10.000
- Ο συντελεστής αραίωσης στον τέταρτο σωλήνα σε αυτή την αραίωση αλυσίδας είναι 1: 10.000. Η συγκέντρωση της ουσίας μετά την αραίωση είναι 10.000 φορές χαμηλότερη από ό, τι πριν αραιωθεί.
Βήμα 2. Προσδιορίστε τη συγκέντρωση του διαλύματος μετά από αραίωση
Για να προσδιορίσετε την τελική συγκέντρωση ενός διαλύματος μετά από αραίωση αλυσίδας, πρέπει να γνωρίζετε την αρχική του συγκέντρωση. Ο τύπος είναι Cτέλος = Γαρχή/Δ, Γτέλος είναι η τελική συγκέντρωση του αραιωμένου διαλύματος, Cαρχή είναι η αρχική συγκέντρωση του αρχικού διαλύματος και D είναι η προκαθορισμένη αναλογία αραίωσης.
- Για παράδειγμα: Εάν ξεκινήσετε με ένα διάλυμα κυττάρων του οποίου η συγκέντρωση είναι 1.000.000 κύτταρα ανά mL και ο λόγος αραίωσης είναι 1.000, ποια είναι η τελική συγκέντρωση του αραιωμένου δείγματος;
-
Χρησιμοποιώντας τον τύπο:
- ντοτέλος = Γαρχή/ΡΕ
- ντοτέλος = 1.000.000/1.000
- ντοτέλος = 1000 κύτταρα ανά mL.
Βήμα 3. Βεβαιωθείτε ότι όλες οι μονάδες είναι ίδιες
Όταν εκτελείτε οποιονδήποτε υπολογισμό, βεβαιωθείτε ότι οι μονάδες είναι πάντα οι ίδιες στο τέλος του υπολογισμού. Εάν η αρχική μονάδα είναι κελιά ανά ml, βεβαιωθείτε ότι οι μονάδες παραμένουν οι ίδιες στο τέλος του υπολογισμού. Εάν η αρχική συγκέντρωση είναι μέρη ανά εκατομμύριο (bpd), τότε η τελική συγκέντρωση πρέπει επίσης να είναι σε μονάδες bpj.
