Υπάρχουν πολλοί τρόποι μέτρησης της ανάπτυξης των βακτηρίων και ένας τρόπος είναι πιο περίπλοκος από τον άλλο. Παρόλο που μερικές φορές η συνέπεια της μέτρησης πρέπει να αγνοηθεί, ο ευκολότερος τρόπος είναι αρκετός για να μετρήσει με ακρίβεια την ανάπτυξη των βακτηρίων, ώστε να χρησιμοποιείται συχνά. Οι πιο συχνά χρησιμοποιούμενες μέθοδοι είναι η παρακολούθηση και η καταμέτρηση βακτηρίων, η μέτρηση ξηρής ή υγρής μάζας και η μέτρηση των επιπέδων θολερότητας/θολερότητας. Το εργαστήριο του σχολείου σας θα πρέπει να διαθέτει τα εργαλεία και τον εξοπλισμό που απαιτούνται για να εκτελέσετε τουλάχιστον ένα από αυτά τα πειράματα.
Βήμα
Μέθοδος 1 από 3: Παρακολούθηση ζωντανών βακτηρίων
Βήμα 1. Προετοιμάστε τα συστατικά
Υπάρχουν πολλά ειδικά εργαλεία που πρέπει να προετοιμαστούν και μπορεί να μην είναι διαθέσιμα σε εργαστήριο βιολογίας. Προετοιμάστε όλο τον εξοπλισμό και τα δοχεία πριν εκτελέσετε το πείραμα, ώστε να μην υπάρχει ταλαιπωρία κατά τη διαδικασία. Θα πρέπει να γνωρίζετε κάθε συστατικό που χρησιμοποιείται αμέσως και τους βασικούς όρους αυτού του πειράματος.
- Προετοιμάστε τον θάλαμο μέτρησης. Διαθέτει ενσωματωμένο θάλαμο, γυαλί μικροσκοπίου και μικροσκόπιο, ώστε να είναι εύκολο στη ρύθμιση και στη χρήση. Μπορείτε να το αγοράσετε από εργαστήριο ή κατάστημα σχολικών ειδών. Αυτό το εργαλείο θα πρέπει να έχει οδηγίες που θα σας καθοδηγούν σε όλη τη διαδικασία.
- Προετοιμάστε ένα φλιτζάνι που χύνεται ή απλώνετε. Και τα δύο αυτά δοχεία σας επιτρέπουν να παρακολουθείτε τα βακτήρια μέσα.
- Η καλλιέργεια είναι ένας όρος που χρησιμοποιείται για να περιγράψει την ανάπτυξη οργανισμών σε ένα πείραμα.
- Ο ζωμός είναι ένα υγρό μέσο στο οποίο αναπτύσσεται η καλλιέργεια.
Βήμα 2. Χρησιμοποιήστε τη μέθοδο της πλάκας ρίψης ή της πλάκας απλώματος
Μπορείτε επίσης να τοποθετήσετε τα βακτήρια απευθείας στο πιάτο για προβολή χρησιμοποιώντας μικροσκόπιο. Ρίξτε την καλλιέργεια σε ένα πιατάκι και τοποθετήστε το κάτω από το μικροσκόπιο. Παρακολουθήστε τον αριθμό των βακτηριακών κυττάρων που υπάρχουν.
Βήμα 3. Βεβαιωθείτε ότι η δόση συγκέντρωσης είναι σωστή
Εάν υπάρχουν πάρα πολλά, τα βακτήρια θα συσσωρευτούν το ένα πάνω στο άλλο και μπορεί να κάνετε λάθος υπολογισμό. Αραιώστε την καλλιέργεια αναμειγνύοντας σε περισσότερο ζωμό. Εάν υπάρχουν πολύ λίγα, τα αποτελέσματα του υπολογισμού δεν θα είναι ακριβή. Σουρώνουμε το ζωμό χρησιμοποιώντας σύστημα διήθησης.
Βήμα 4. Μετρήστε τα βακτήρια
Το τελευταίο βήμα είναι να μετρήσετε τα βακτήρια ένα προς ένα. Κοιτάξτε μέσα από τον μεγεθυντικό φακό στον θάλαμο μέτρησης και σημειώστε τον αριθμό των βακτηρίων που βλέπετε. Συγκρίνετε τα αποτελέσματα με τα αποτελέσματα άλλων δοκιμών.
Μέθοδος 2 από 3: Μέτρηση ξηρής και υγρής μάζας
Βήμα 1. Βεβαιωθείτε ότι έχετε τον κατάλληλο εξοπλισμό
Αυτή η μέθοδος χρησιμοποιεί ακριβό εξοπλισμό και πολύ χρόνο. Εάν το εργαστήριό σας δεν διαθέτει τον εξοπλισμό που χρειάζεστε, είναι καλή ιδέα να χρησιμοποιήσετε μια άλλη μέθοδο. Ωστόσο, εάν το εργαστήριό σας είναι επαρκώς καλά εξοπλισμένο, προτείνουμε αυτήν τη μέθοδο καθώς παρέχει πιο σταθερά αποτελέσματα. Σε αυτή τη μέθοδο, θα χρειαστείτε:
- Φούρνος μεταφοράς υδραυλικής βαρύτητας
- Δοχείο ζύγισης από αλουμίνιο
- Ένα σύνολο φιαλών (μπουκάλια εργαστηρίου)
- Φυγοκεντρική μηχανή (φυγόκεντρος) ή εργαστηριακό σύστημα φιλτραρίσματος
Βήμα 2. Βεβαιωθείτε ότι η καλλιέργεια βρίσκεται στη φιάλη
Προσθέστε την κουλτούρα στην κολοκύθα. Σε αυτό το στάδιο, ο πολιτισμός πρέπει να είναι ζωμός, αν και αργότερα θα διαχωριστεί ξανά.
Βήμα 3. Στεγνώστε το δοχείο ζύγισης αλουμινίου στο φούρνο του εργαστηρίου
Αντ 'αυτού, μπορείτε να χρησιμοποιήσετε μεμβράνη φίλτρου οξικής κυτταρίνης με διάμετρο 47 mm και μέγεθος πόρων 0,45μm. Όποιο κιβώτιο ζύγισης χρησιμοποιείτε, ζυγίστε το καθώς θα πρέπει να αφαιρεθεί αργότερα όταν ζυγίζετε βακτηριακά κύτταρα.
Βήμα 4. Αναδεύστε τη καλλιέργεια στη φιάλη μέχρι να αναμειχθεί ομοιόμορφα
Το κύτταρο θα βυθιστεί φυσικά λόγω της βαρύτητας και θα πρέπει να αναδευτεί για να απλωθεί ομοιόμορφα στη φιάλη. Με αυτόν τον τρόπο, μπορείτε να έχετε περισσότερα δείγματα.
Βήμα 5. Χρησιμοποιήστε φυγόκεντρο για να διαχωρίσετε τα βακτηριακά κύτταρα από το ζωμό
Αυτό το εργαλείο περιστρέφει τη φιάλη και εξισορροπείται γρήγορα έτσι ώστε να αποστραγγίζει το ζωμό και να αφήνει την καλλιέργεια στη φιάλη.
Βήμα 6. Ξύστε την πάστα στην κολοκύθα και βάλτε την σε ένα δοχείο ζύγισης
Πετάξτε το ζωμό γιατί δεν τον χρειάζεστε πια. Ωστόσο, μην απαλλαγείτε από την κολοκύθα ακόμα επειδή θα εξακολουθεί να χρησιμοποιείται.
Βήμα 7. Ξεπλύνετε τη φυγόκεντρο μηχανή και ρίξτε το νερό έκπλυσης στο δοχείο
Ρίξτε το νερό έκπλυσης στη φιάλη στα βακτηριακά κύτταρα για να αποκτήσετε το υγρό βάρος.
Βήμα 8. Βρείτε το ξηρό βάρος
Για να μετρήσετε το ξηρό βάρος, τοποθετήστε το δοχείο στο φούρνο και στεγνώστε στους 100 ° C για 6-24 ώρες σύμφωνα με τις οδηγίες του φούρνου και/ή του δοχείου ζύγισης που χρησιμοποιείται. Βεβαιωθείτε ότι η θερμοκρασία δεν είναι πολύ υψηλή, ώστε τα βακτήρια να μην καούν. Ζυγίστε τα βακτήρια όταν τελειώσετε και μην ξεχάσετε να μειώσετε το αποτέλεσμα κατά το βάρος του δοχείου ζύγισης.
Μέθοδος 3 από 3: Μέτρηση της θολερότητας
Βήμα 1. Προετοιμάστε τον απαραίτητο εξοπλισμό
Θα χρειαστείτε φωτεινή πηγή και φασματοφωτόμετρο. Και τα δύο μπορούν να ληφθούν σε εργαστήρια προμηθειών εργαστηρίου. Το φασματοφωτόμετρο πρέπει να έχει οδηγίες που θα σας καθοδηγήσουν στη χρήση του οργάνου σύμφωνα με το μοντέλο που έχετε. Η τιμή του φασματοφωτόμετρου είναι αρκετά προσιτή και εύκολη στη χρήση, έτσι ώστε να γίνει μία από τις πιο συχνά χρησιμοποιούμενες μεθόδους για τη μέτρηση της ανάπτυξης βακτηρίων.
Βήμα 2. Φωτίστε το δείγμα
Σύμφωνα με τον όρο του Layman, η θολερότητα είναι το επίπεδο θολότητας ενός δείγματος. Πρέπει να λάβετε τον αριθμό μέτρησης της θολερότητας, ο οποίος μετριέται σε NTU (Μονάδα Νεφελομετρικής Θολερότητας). Αυτό το εργαλείο πρέπει να βαθμονομηθεί προτού μπορέσει να μετρήσει με ακρίβεια το δείγμα.
Βήμα 3. Καταγράψτε τα αποτελέσματα
Η θολερότητα επηρεάζεται από τον αριθμό των βακτηρίων στο δείγμα. Το φασματοφωτόμετρο θα σας πει επίσης το ποσοστό μετάδοσης (%T). Ο αριθμός αυτός θα αυξηθεί εάν μειωθεί η θολερότητα. Συγκρίνετε τα αποτελέσματα με τα αποτελέσματα άλλων δοκιμών για τη μέτρηση της ανάπτυξης βακτηρίων.
Προειδοποίηση
- Δεδομένου ότι έχετε να κάνετε με βακτηριακή αποικία, λάβετε προφυλάξεις φορώντας εξοπλισμό ασφαλείας όπως γυαλιά και γάντια ασφαλείας. Είναι επίσης καλή ιδέα να φοράτε μάσκα, ειδικά αν δεν γνωρίζετε τον τύπο των βακτηρίων που μελετώνται.
- Πάρτε προφυλάξεις πριν χειριστείτε οποιοδήποτε τύπο βακτηρίων, ακόμη και τον ακίνδυνο τύπο. Βεβαιωθείτε ότι όλες οι ανοιχτές πληγές στο σώμα σας καλύπτονται πλήρως πριν ξεκινήσετε.
